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本文由中國藥科大學藥物代謝與藥代動力學重點實驗室發(fā)表于Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 4971–4979。

迄今為止，中藥的藥代動力學研究仍處于起步階段，在生物基質復雜組分的定性和定量分析方面面臨著嚴峻的技術挑戰(zhàn)。此外，缺乏標準品是評估中藥藥代動力學的另一個瓶頸。本項工作借助液相色譜-離子阱-飛行時間質譜聯(lián)用法（LC-IT-TOF/MS），開發(fā)了一個用于中藥成分的定性和定量藥代動力學分析的強大技術平臺，并提出一個無需標準品的相對暴露策略，用于藥代動力學評估。

以五味子木脂素提取物（SLE）為例，首次將LC-IT-TOF/MS法用于SLE本身和SLE給藥后大鼠血漿中所含成分的全面定性分析。隨后，本研究通過與成熟的LC-Q/MS分析方法的比較，來驗證LC-IT-TOF/MS分析方法的定量性能。對于有標準品的5種木脂素組分的絕對定量，兩種分析方法顯示出非常相似的優(yōu)點，如線性、精密度、準確度和藥代動力學參數(shù)。與LC-Q/MS法相比，LC-IT-TOF/MS法的突出優(yōu)點是靈敏度更高。

此外，開發(fā)了一種“相對暴露方法”（REA），該方法無需每種成分的標準品，而是使用順序稀釋的原始中藥制劑來制備“混合校準曲線”，以評估中藥藥代動力學。這種方法與有標準品的典型藥代動力學分析相比，能夠提供除了絕對血漿濃度之外，幾乎相同的藥代動力學參數(shù)。該方法將廣泛應用于但不限于中藥的定性和定量藥代動力學分析。

表1 LC-IT-TOF/MS和LC-Q/MS檢測大鼠血漿中五味子醇A、五味子醇B、五味子甲素A、五味子甲素B、五味子酯A的含量、精密度和準確度

圖1 LC-IT-TOF/MS和LC-Q/MS測定的5種木脂素的血漿濃度與時間的關系

(A)五味子醇A、(B)五味子醇B、(C)五味子甲素A、(D)五味子甲素B、(E)五味子酯A

圖2 用LC-IT-TOF/MS測定21種木脂素的血漿藥代動力學

圖3 基于LC-IT-TOF/MS測定的REA和基于LC-Q/MS測定的絕對曝光法計算的AUC和Cmax值

圖4 開發(fā)的基于LC-IT-TOF/MS的中藥藥代動力學分析平臺和工作流程

缺乏強大的分析平臺仍然是評估復雜中藥藥代動力學和藥物分布的主要障礙。除了技術上的挑戰(zhàn)，缺乏標準品是描述中藥藥代動力學的另一個巨大和長期的障礙。為了解決這一問題，我們在本研究中開發(fā)了一種相對暴露方法，該方法基于在校準樣品中添加相應的草藥制劑的校準方程來計算每個成分的相對血漿濃度。除絕對血藥濃度外，該方法可成功獲得所有重要的藥代動力學參數(shù)，所得結果與用標準品校準的典型測定結果基本一致。

因此，本研究基于單一LC-IT-TOF/MS平臺，無需驗證和校準用的標準品，建立了一個系統(tǒng)的方法來解決中藥藥代動力學領域的關鍵問題，對數(shù)十個目標成分和非目標成分進行定性和定量測定。

文獻題目

《Qualitative and quantitative determination of complicated herbal components by liquid chromatography hybrid ion trap time-of-?ight mass spectrometry and a relative exposure approach to herbal pharmacokinetics independent of standards》

使用儀器

島津LC–IT-TOF/MS

作者

Yan Liang^a, Haiping Hao^a,?, An Kang^a, Lin Xie^a, Tong Xie^a, Xiao Zheng^a, Chen Dai^a, Leren Wan^b,

Longsheng Sheng^a, Guangji Wang^a,??

a Key Lab of Drug Metabolism & Pharmacokinetics, China Pharmaceutical University, No. 24, Tongjiaxiang Street, Nanjing 210009, China

b Shanghai Of?ce, Shimadzu (Hongkong) Limited Co, No. 381, Futexi Road, Shanghai 200020, China

? Corresponding author. Tel.: +86 25 83271179; fax: +86 25 83271060.

?? Corresponding author. Tel.: +86 25 83271128; fax: +86 25 83302827.